透析 dialysis
定義:依據(jù)濃度梯度的差別將分子量低的分子或離子通過透析膜從溶液中去除的操作。
學(xué)科:化學(xué)_分析化學(xué)_化學(xué)分析
相關(guān)名詞:透析膜 透析液 微透析
【延伸閱讀】
透析是把待分離或純化的樣品封入由半透膜(透析膜)構(gòu)成的袋子(透析袋)內(nèi),然后將袋子放入低離子強度的液體(透析液)中進行滲透。整個滲透過程既有溶劑流動,又有溶質(zhì)流動。透析膜根據(jù)需要有不同的規(guī)格,使得膜內(nèi)分子量小于某一分子量的分子才能透過膜進入透析液中,從而實現(xiàn)大分子與小分子的分離或生物大分子的純化。
為了加速透析進程,一般透析過程中要連續(xù)攪拌,同時在透析袋內(nèi)留下大約總體積10%的空隙,以便使透析膜界面兩側(cè)能透過膜的分子濃度梯度加大。當(dāng)兩側(cè)濃度相當(dāng)時,透析便達(dá)到平衡。如要進一步透析,則需更換透析液。勤換透析液或使用較大量的透析液都能加快透析進程。
常用的透析膜材料有火棉膠、玻璃紙以及纖維素等。膜孔徑的大小可以有不同規(guī)格,在醫(yī)藥工業(yè)中常使用纖維素透析管。透析管的選擇主要考慮分子量阻截范圍,其次考慮管的尺寸(一般以管的直徑表示)。透析管使用之前一般要進行適當(dāng)處理,以除去甘油、重金屬離子、含硫污染物及可能存在的蛋白或核酸水解酶類等。
最常見的透析液是水,在純水中透析一般速度較快,但有可能造成生物物質(zhì)活性喪失。通常選擇具有一定pH和離子強度的緩沖液作為透析液,有時也選擇高分子惰性物質(zhì)的濃溶液。高分子不會進入膜內(nèi),而水分子可以從膜孔自由出入。這種情況下,除了正常透析之外,由于膜內(nèi)外存在滲透壓差,膜內(nèi)更多的水會透析到膜外,直到內(nèi)外滲透壓達(dá)到平衡為止,因而也具有濃縮樣品的功能。
例如在分離及純化蛋白質(zhì)和酶時,經(jīng)常要加入有機溶劑或無機鹽類(如硫酸銨或硫酸鈉)以沉淀蛋白質(zhì)類生物大分子。生物大分子沉淀時不可避免地混雜有一些小分子,從而干擾生物大分子的進一步純化或性質(zhì)鑒定。透析法是除去這些小分子的簡便而有效的方法。如果去除小分子的同時還需要使樣品濃縮,則選擇濃的惰性高分子溶液作為透析液。
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